酶聯(lián)免疫試劑盒是酶免疫測定技術(shù)中應用很廣的技術(shù)。聯(lián)免疫檢測試劑盒(ELISAkit)是一種快速、方便、準確的檢測樣品中靶蛋白的研究工具,被用于許多重要的研究領(lǐng)域,包括癌癥、心血管、細胞生物學(xué)、表觀(guān)遺傳學(xué)、新陳代謝、免疫學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、信號轉導等。
其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應板)表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。
酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項:
1、試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
2、實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7、底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立
即讀取OD值。
8、加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
9、按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。